Cloning and Expression of Serotype-2 Simian Betaretrovirus Reverse Transcriptase Gene Isolated from Indonesian Cynomolgus Monkey in Escherichia coli  

Oleh:

Saepuloh, Uus ; Iskandriati, Diah ; Hoetama, Fungkey ; Mariya, Sela. S

Jenis: Article from Journal - ilmiah nasional - terakreditasi DIKTI
Dalam koleksi: Microbiology Indonesia vol. 07 no. 2 (Jun. 2013), page 59-67.
Topik: enzim rekombinan; reverse transcriptase; sistem ekspresi Escherichia coli ; SRV-
Fulltext: 3 199-686-2-PB_Paskl.pdf (655.57KB)

Ketersediaan

Perpustakaan Pusat (Semanggi) Nomor Panggil: MM78 Non-tandon: 1 (dapat dipinjam: 0) Tandon: tidak ada

Lihat Detail Induk

Isi artikel

Pada penelitian ini, dilakukan isolasi gen reverse transcriptase (RT) simian betaretrovirus serotipe-2 (SRV- 2) yang menginfeksi monyet ekor panjang (Macaca fascicularis) asal Indonesia. Gen tersebut selanjutnya diklonakan ke dalam sistem ekspresi Escherichia coli. Gen RT SRV-2 berada pada posisi nukleotida 3284-4925 di daerah polyprotein (Pol) yang mengkodekan 547 asam amino. Analisis hasil ekspresi menggunakan teknik SDS-PAGE dan western blot menunjukkan adanya pita protein spesifik berukuran 64,9 kDa yang diperkirakan sebagai enzim rekombinan RT SRV-2. Pemurnian enzim rekombinan RT SRV-2 menghasilkan 312 µg mL-1 protein yang memiliki aktivitas enzim sebesar 7,1 U µL-1. Aplikasi enzim rekombinan RT SRV-2 pada teknik reverse transcription-PCR (RT-PCR) terhadap target gen ß-globin dan ß-aktin menghasilkan pita DNA berukuran 206 dan 350 pb. Dengan demikian, enzim rekombinan RT SRV-2 terbukti berfungsi memiliki aktivitas enzim walaupun aktivitasnya masih rendah.

Opini Anda

Klik untuk menuliskan opini Anda tentang koleksi ini!

Kembali