| Cacing tanah Lumbricus rubellus menghasilkan enzim yang bersifat fibrinolitik, yang dikenal sebagai lumbrokinase. Enzim ini berperan sebagai agen antitrombosis karena aktivitasnya yang dapat mendegradasi fibrin/fibrinogen sekaligus menstimulasi plasminogen menjadi plasmin. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis profil protein dan aktivitas enzim fibrinolitik dari ekstrak L. Rubellus lokal dengan menggunakan analisis 1D dan 2D SDS-PAGE serta 1D dan 2D-zimografi dengan substrat berupa fibrinogen 1% b/v. Cacing tanah yang digunakan berasal dari Pusat Studi Satwa Primata, Bogor. Enzim fibrinolitik diekstrak dan disemimurnikan dengan menggunakan beberapa perlakuan pH, yaitu dengan buffer ekstraksi pH 3,5,7,dan 9. Sampel berupa larutan tepung cacing terlebih dahulu dipurifikasi menggunakan AKTA Sephadex G-25 gel filtrasi sebelum digunakan sebagai sampel dalam 2D elektroforesis. Perlakuan pada sampel 2D elektroforesis dibagi menjadi dua yaitu rehidrasi sampel dengan 50 mM DTT dan tanpa DTT. Hasil penelitian menunjukkan bahwa buffer ekstraksi pH 7 merupakan buffer yang paling baik untuk mengekstraksi enzim fibrinolitik karena memberikan hasil zimogram yang lebih jelas. Dalam penelitian ini, berhasil dideteksi aktivitas enzim fibrinolitik dengan teknik kombinasi 2D elektroforesis dan zimografi, baik untuk sampel dengan perlakuan dengan dan tanpa DTT. Enzim ini terdiri dari 12 fraksi enzim fibrinolitik, yang memiliki titik isoelektrik sekitar 4,3-4,9 dan berat molekul sekitar 17-36 kD. Enzim ini memiliki struktur yang kompak sehingga tahan terhadap pengaruh DTT dan masih dapat berenaturasi serta mendegradasi substrat fibrinogen dengan baik. |