| Enzim endonuklease restriksi diekstraksi dari bakteri Escherichia coli asal sampel makanan di Jakarta dengan terlebih dahulu disonikasi, dan selanjutnya dipurifikasi dengan menggunakan kromatografi afinitas dengan matrix HiTrap Heparine (elusi dengan NaCl 2 M pH 7). Dari ke enam puncak yang diperoleh, hanya puncak ke lima (A5) yang menunjukkan adanya aktivitas endonuklease restriksi. Sampel (23) dari fraksi A5 dianalisis dengan beberapa ion logam, suhu, pH, dan volume enzim. Dalam uji aktivitas digunakan DNA fage lambda sebagai substrat. Berdasarkan hasil, diperoleh dua pita linear baru hasil pemotongan DNA lambda setelah inkubasi 3 jam. Ukuran masing-masing pita diperkirakan sekitar 24 kb dan 22 kb. Enzim ini bekerja baik pada suhu 37°C, pH 7.5, dan membutuhkan kehadiran ion logam MnCl2 dengan konsentrasi 50-100 mM dalam reaksi enzim. Enzim ini diduga merupakan isoschizomer dari Eco52I atau Eco105I. |